722紫外分光光度計(jì)作為實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)分析儀器,廣泛用于測(cè)定物質(zhì)在190–1100nm波段的吸光度,從而實(shí)現(xiàn)定量分析(如蛋白質(zhì)、核酸、重金屬絡(luò)合物等)。其操作看似簡(jiǎn)單,但若步驟不規(guī)范,易引入誤差,影響數(shù)據(jù)可靠性。掌握
722紫外分光光度計(jì)正確使用方法,是獲得準(zhǔn)確、可重復(fù)結(jié)果的前提。

一、使用前準(zhǔn)備
環(huán)境要求:
置于干燥、無(wú)強(qiáng)光直射、無(wú)腐蝕性氣體的實(shí)驗(yàn)臺(tái),避免震動(dòng);
預(yù)熱儀器30分鐘,使光源與電子系統(tǒng)穩(wěn)定(尤其氘燈需充分預(yù)熱);
比色皿選擇:
紫外區(qū)(<400nm)必須使用石英比色皿,玻璃或塑料會(huì)強(qiáng)烈吸收紫外光;
可見(jiàn)光區(qū)可使用玻璃或光學(xué)塑料皿,但需保持透光面潔凈無(wú)劃痕;
空白校正:
用待測(cè)樣品的溶劑(如去離子水、緩沖液)作為空白,裝入匹配的比色皿;
擦凈外壁指紋與水漬,毛面朝手,光面朝光路。
二、規(guī)范測(cè)量流程
開(kāi)機(jī)自檢:打開(kāi)電源,確認(rèn)光源正常點(diǎn)亮(鎢燈紅光、氘燈藍(lán)紫光);
波長(zhǎng)設(shè)定:旋轉(zhuǎn)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)旋鈕至目標(biāo)波長(zhǎng)(如280nm測(cè)蛋白),數(shù)字窗口確認(rèn)數(shù)值;
100%T/0Abs校準(zhǔn):
將空白比色皿放入樣品室,關(guān)閉蓋子;
按“100%T”或“AutoZero”鍵,使儀器基線歸零;
樣品測(cè)量:
取出空白,放入樣品比色皿,關(guān)閉蓋子;
待讀數(shù)穩(wěn)定后記錄吸光度(A)值;
若樣品濃度過(guò)高(A>1.0),應(yīng)稀釋后重測(cè),確保在線性范圍。
三、使用后維護(hù)
測(cè)量完畢,倒掉比色皿內(nèi)液體,用去離子水沖洗3次,晾干存放;
關(guān)閉光源(部分機(jī)型可單獨(dú)關(guān)氘燈以延長(zhǎng)壽命),再關(guān)閉總電源;
定期用鏡頭紙清潔樣品室反光鏡與光窗,防止灰塵積聚;
長(zhǎng)期不用時(shí),放入干燥劑防潮。